เพื่อค้นหาหลักฐานโดยตรง ทีมวิจัยจึงเริ่มออกแบบวิธีการศึกษาที่เกี่ยวข้องตั้งแต่ปี 2010 และตั้งแต่ปี 2012 เป็นต้นมา ได้มีการเก็บตัวอย่างปัสสาวะของเด็กนักเรียนประมาณ 1,500 ตัวอย่างในมณฑลเจียงซู เจ้อเจียง และเซี่ยงไฮ้ทุกปี และจะดำเนินการเก็บตัวอย่างต่อไปจนถึงปี 2014 ในขณะเดียวกัน นักวิจัยของกลุ่มวิจัยได้ค้นคว้าและพัฒนาวิธีการตรวจวัดยาปฏิชีวนะหลายชนิดในตัวอย่างปัสสาวะที่มีประสิทธิภาพสูง หลังจากทำการวิจัยและพัฒนาในห้องปฏิบัติการมาอย่างยาวนาน
เพื่อศึกษาผลกระทบของการใช้ยาปฏิชีวนะในวัยเด็กหรือการได้รับยาปฏิชีวนะจากอาหารต่อการผลิตไขมันในเด็ก ทีมวิจัยได้ใช้วิธีการตรวจวัดยาปฏิชีวนะทางชีวภาพเป็นครั้งแรกของโลก โดยเก็บตัวอย่างปัสสาวะจากเด็กวัยเรียนอายุ 8-11 ปี จำนวน 586 คน ในเซี่ยงไฮ้ เมื่อปี 2556 ผลการศึกษาพบว่ามียาปฏิชีวนะ 21 ชนิดในปัสสาวะ ซึ่งรวมถึงยาปฏิชีวนะกลุ่มมาโครไลด์ 5 ชนิด ยาปฏิชีวนะกลุ่มเบตาแลคแทม 2 ชนิด ยาปฏิชีวนะกลุ่มเตตราไซคลิน 3 ชนิด ยาปฏิชีวนะกลุ่มควินโนโลน 4 ชนิด ยาปฏิชีวนะกลุ่มซัลโฟนาไมด์ 4 ชนิด และตรวจพบยาปฏิชีวนะอย่างน้อย 1 ชนิดจาก 21 ชนิดนี้ในปัสสาวะของเด็กวัยเรียน 79.6%
เพื่อชี้แจงความสัมพันธ์ระหว่างยาปฏิชีวนะกับโรคอ้วน นักวิจัยได้แบ่งเด็กออกเป็นสามกลุ่ม โดยเรียงจากกลุ่มที่มีระดับยาปฏิชีวนะสำหรับสัตว์ในปัสสาวะต่ำไปสูง
หลังจากปรับปัจจัยต่างๆ เช่น เพศ อายุ ระดับการศึกษาของผู้ปกครอง ระดับรายได้ การบริโภคอาหารประเภทพองตัว สถานะการสูบบุหรี่ของญาติและเพื่อนแล้ว การศึกษาพบว่า เมื่อเปรียบเทียบกับเด็กในกลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำ ความเสี่ยงต่อโรคอ้วนของเด็กในกลุ่มที่มีความเข้มข้นปานกลางและสูงจะสูงกว่ากลุ่มที่มีความเข้มข้นต่ำ 1.99 เท่าถึง 3 เท่า
ในขณะเดียวกัน ทีมวิจัยได้ใช้ดัชนีมวลกายและรอบเอวเพื่อตรวจสอบว่าเด็กมีน้ำหนักเกินหรือเป็นโรคอ้วนหรือไม่ หลังจากวิเคราะห์ปัสสาวะเพิ่มเติม พบว่าการได้รับยาปฏิชีวนะสำหรับสัตว์หรือยาปฏิชีวนะที่ใช้ในสัตว์เป็นหลักมีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับภาวะน้ำหนักเกินหรือโรคอ้วนในเด็ก
นอกจากนี้ยังแสดงให้เห็นว่ามีความสัมพันธ์เชิงบวกระหว่างการได้รับยาปฏิชีวนะ โดยส่วนใหญ่มาจากอาหาร และความเสี่ยงต่อโรคอ้วนในเด็ก นักวิจัยเชื่อว่าแหล่งที่มาของยาปฏิชีวนะสำหรับสัตว์ในสิ่งแวดล้อมเข้าสู่ร่างกายมนุษย์ส่วนใหญ่ผ่านทางน้ำและอาหารที่ปนเปื้อน
จากการศึกษาครั้งนี้ไม่พบผู้ที่มีภาวะอ้วนหรือน้ำหนักเกิน ซึ่งมีความสัมพันธ์อย่างมีนัยสำคัญกับการใช้ยาปฏิชีวนะทางการแพทย์ที่ใช้กันทั่วไปในประชากร ทีมวิจัยเชื่อว่าการใช้ยาปฏิชีวนะทางการแพทย์เป็นการได้รับยาในปริมาณสูงในระยะสั้น ในขณะที่การได้รับยาปฏิชีวนะจากอาหารหรือสิ่งแวดล้อมเป็นการได้รับยาในปริมาณต่ำในระยะยาว ผลการวิจัยนี้ชี้ให้เห็นว่ารูปแบบการได้รับยาปฏิชีวนะอาจเป็นหนึ่งในปัจจัยสำคัญที่ส่งผลต่อการกระตุ้นการสร้างไขมัน
ทีมวิจัยระบุว่า ในปี 2013 การใช้ยาปฏิชีวนะในประเทศจีนสูงถึง 162,000 ตันต่อปี คิดเป็นประมาณครึ่งหนึ่งของการบริโภคทั่วโลก โดย 52% ใช้ในสัตว์ 48% ใช้ในมนุษย์ และมียาปฏิชีวนะมากกว่า 50,000 ตันถูกปล่อยลงสู่แหล่งน้ำและดิน
เนื่องจากประชากรส่วนใหญ่ได้รับยาปฏิชีวนะ และโรคอ้วนในปัจจุบันส่งผลกระทบอย่างมากต่อสุขภาพส่วนบุคคลและการพัฒนาทางสังคม จึงจะมีการขยายขนาดกลุ่มตัวอย่าง และใช้การวิจัยแบบระยะยาวควบคู่กับการวิจัยในสัตว์ทดลอง เพื่อศึกษาเพิ่มเติมถึงผลกระทบของการได้รับยาปฏิชีวนะในปริมาณต่ำของเด็กต่อการเจริญเติบโตและพัฒนาการ รวมถึงผลกระทบต่อสุขภาพของเด็ก
ทีมวิจัยกำลังทดสอบและวิเคราะห์ตัวอย่างน้ำดื่มและตัวอย่างอาหารที่เก็บรวบรวมมา เพื่อชี้แจงแหล่งที่มาหลักของยาปฏิชีวนะดังกล่าวให้ชัดเจนยิ่งขึ้น
